快速PCR扩增检验体系的建立及技术指标验证 |
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引用本文: | 董会,于书欣,孙树毅,曾发明,刘超,李彩霞.快速PCR扩增检验体系的建立及技术指标验证[J].中国法医学杂志,2015(1):36-38. |
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作者姓名: | 董会 于书欣 孙树毅 曾发明 刘超 李彩霞 |
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作者单位: | 南方医科大学;公安部物证鉴定中心北京市现场物证检验工程技术研究中心;昆明医科大学;呼伦贝尔市公安局 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(81202384);中央公益类基本科研业务费项目(2012JB012) |
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摘 要: | 目的建立PCR快速扩增程序和体系,并对其技术指标进行验证。方法运用快速扩增酶Fast Start与DNA TyperTM15 plus primer mix组合并优化建立快速扩增体系,对50份静脉血卡和35份案例检材提取的DNA进行扩增,并对体系检测结果的准确性、稳定性和检材适应性进行验证;采用不同稀释浓度的标准品9947,采用快速扩增方法进行检测,验证体系的灵敏度。结果模板DNA浓度达到0.50ng/μL,采用快速扩增体系可能获得准确分型;扩增耗时仅为69min,比常规扩增方法明显缩短;不同种类检材,经检测均获得良好分型图谱,同一份样本重复实验结果一致、稳定。结论本文建立的快速扩增体系可显著提升检测速率,其灵敏度、准确性、稳定性、检材适用性等技术性能,可满足实际检验的需求。
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关 键 词: | 法医物证学 快速PCR 复合STR扩增试剂 |
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