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致羔羊脑炎粪肠球菌PCR检测方法的建立和应用
引用本文:周霞,王晓兰,剡根强,马勋. 致羔羊脑炎粪肠球菌PCR检测方法的建立和应用[J]. 中国兽医科学, 2008, 38(7)
作者姓名:周霞  王晓兰  剡根强  马勋
基金项目:四川省科技厅基础研究项目 , 石河子大学高层次人才科研启动专项
摘    要:根据肠球菌的保守tuf基因设计引物,以致羔羊脑炎粪肠球菌基因组DNA为模板,扩增出了与设计大小相一致的112 bp的基因片段,成功地建立了检测致羔羊脑炎肠球菌的PCR方法.确立的PCR反应最佳条件为:复性温度55℃,Mg2+浓度2.5 μmol/L,最佳反应模式为95℃5 min;94℃30 s,55℃30 s,72℃30 S,35个循环;最后72℃延伸10 min,于4℃结束反应.该方法能检测DNA的最小量为10 fg.应用该方法对分离的致羔羊脑炎粪肠球茵、由肠球菌导致发病或死亡羔羊脏器以及人工感染死亡小鼠的主要脏器进行扩增,均能得到特异性的DNA条带;对其他7种病原菌,马腺疫链球菌C群、G群链球菌、A群链球菌、金黄色葡萄球菌、羊源李氏杆菌、绵羊布氏杆菌、绵羊肺炎支原体不能扩增出特异的DNA条带.

关 键 词:羔羊脑炎  粪肠球菌  聚合酶链式反应  羔羊  脑炎  粪肠球菌  检测方法  应用  encephalitis  Enterococcus  detection  assay  application  绵羊肺炎支原体  羊布氏杆菌  李氏杆菌  黄色葡萄球菌  链球菌  病原菌  主要脏器  小鼠  人工感染  死亡

Development and application of a PCR assay for detection of Enterococcus faecalis causing lamb encephalitis
ZHOU Xia,WANG Xiao-lan,YAN Gen-qiang,MA Xun. Development and application of a PCR assay for detection of Enterococcus faecalis causing lamb encephalitis[J]. Chinese Veterinary Science, 2008, 38(7)
Authors:ZHOU Xia  WANG Xiao-lan  YAN Gen-qiang  MA Xun
Abstract:
Keywords:
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