| 鸡法氏囊B淋巴细胞全长cDNA表达文库的构建 |
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| 引用本文： | 张礼洲,祁小乐,高玉龙,王笑梅.鸡法氏囊B淋巴细胞全长cDNA表达文库的构建[J].中国兽医科学,2012(10):1012-1016. |
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| 作者姓名： | 张礼洲 祁小乐 高玉龙 王笑梅 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30901083);现代农业产业技术体系建设专项(nycytx-42-G3-01) |
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| 摘 要： | 分离纯化了3～4周龄SPF雏鸡法氏囊B淋巴细胞的mRNA,通过琼脂糖凝胶电泳确定其质量,运用SMART技术合成第一链cDNA,LD-PCR合成第二链cDNA,经SfiⅠ酶切后定向导入真核表达质粒pEXP-Lib中,构建了全长cDNA表达文库。初级文库的库容量达1.98×105 CFU,扩增后的库容量为2.35×109CFU。PCR鉴定结果显示,文库的重组率约为100%,且插入片段分布于500～2 000bp之间。对随机挑选的22个克隆进行测序,其中20个与原鸡序列的同源性在97%以上,另外2个为未知序列。结果表明,构建的cDNA文库具备较高的库容量和重组率,为进一步筛选鸡传染性法氏囊炎病毒(IBDV)受体及感染相关基因奠定了良好基础。
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| 关 键 词： | IBDV 法氏囊 B淋巴细胞 SMART cDNA表达文库 |
Construction of full-length cDNA expression library of B lymphoid cells in the bursa of Fabricius by SMART technology |
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| ZHANG Li-zhou,QI Xiao-le,GAO Yu-long,WANG Xiao-mei.Construction of full-length cDNA expression library of B lymphoid cells in the bursa of Fabricius by SMART technology[J].Veterinary Science in China,2012(10):1012-1016. |
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| Authors: | ZHANG Li-zhou QI Xiao-le GAO Yu-long WANG Xiao-mei |
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| Institution: | (National Key Laboratory of Veterinary Biotechnology/Harbin Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agriculture Sciences,Harbin 150001,China) |
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