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猪PD-1分子及其配体的实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立
引用本文:彭金美,李登云,田志军,安同庆,刘恒贵,周艳君,童光志. 猪PD-1分子及其配体的实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立[J]. 中国兽医科学, 2010, 40(4)
作者姓名:彭金美  李登云  田志军  安同庆  刘恒贵  周艳君  童光志
作者单位:彭金美,PENG Jin-mei(东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨,150030;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室,黑龙江哈尔滨,150001);李登云,田志军,安同庆,LI Deng-yun,TIAN Zhi-jun,AN Tong-qing(中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室,黑龙江哈尔滨,150001);刘恒贵,LIU Heng-gui(香港大学李嘉诚医学院艾滋病研究所,香港,SAR);周艳君,ZHOU Yan-jun(中国农业科学院上海兽医研究所,上海,200241);童光志,TONG Guang-zhi(东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨,150030;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室,黑龙江哈尔滨,150001;中国农业科学院上海兽医研究所,上海,200241) 
基金项目:国家重点基础研究发展规划(973计划),兽医生物技术国家重点实验室自主研究项目 
摘    要:根据猪程序性死亡因子PD-I及其配体PD-LI和PD-L2的基因序列,分别设计了特异性引物和TaqMan探针,以10倍系列稀释的重组质粒pMD-PD-1、pMD-PD-L1和pMD-PD-L2为标准品,对实时荧光定量PCR的条件进行优化,以建立定量检测这3个基因的方法.结果表明,建立的方法在1×10~2~1×10~8copies/μL模板范围内具有良好的线性关系(r~2>0.99),扩增效率均高于96%,可检测至少100 copies的阳性标准品.利用该方法对猪外周血单核细胞中这3个基因的表达情况进行了检测,结果也表明该方法具有良好的敏感性、特异性和重复性,可应用于临床样品的检测.

关 键 词:实时荧光定量聚合酶链反应  PD-1基因  PD-L1基因  PD-L2基因

Establishment of a real-time fluorescent quantitative RT-PCR assay for detection of porcine PD-1,PD-L1 and PD-L2 genes
PENG Jin-mei,,LI Deng-yun,TIAN Zhi-jun,AN Tong-qing,LIU Heng-gui,ZHOU Yan-jun,TONG Guang-zhi,(.College of Veterinary Medicine,Northeast Agricultural University,Harbin ,China,.State Key Laboratory of Veterinary Biotechnology /Division of Swine Infectious Diseases,Harbin Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Harbin . Establishment of a real-time fluorescent quantitative RT-PCR assay for detection of porcine PD-1,PD-L1 and PD-L2 genes[J]. Chinese Veterinary Science, 2010, 40(4)
Authors:PENG Jin-mei    LI Deng-yun  TIAN Zhi-jun  AN Tong-qing  LIU Heng-gui  ZHOU Yan-jun  TONG Guang-zhi  (.College of Veterinary Medicine  Northeast Agricultural University  Harbin   China  .State Key Laboratory of Veterinary Biotechnology /Division of Swine Infectious Diseases  Harbin Veterinary Research Institute  Chinese Academy of Agricultural Sciences  Harbin
Affiliation:PENG Jin-mei1,2,LI Deng-yun2,TIAN Zhi-jun2,AN Tong-qing2,LIU Heng-gui4,ZHOU Yan-jun3,TONG Guang-zhi1,3(1.College of Veterinary Medicine,Northeast Agricultural University,Harbin 150030,China,2.State Key Laboratory of Veterinary Biotechnology /Division of Swine Infectious Diseases,Harbin Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Harbin 150001,3.Shanghai Veterinary Research Institute,Shanghai 200241,4.AIDS Institute,Li Ka Shing...
Abstract:
Keywords:real-time fluorescent quantitative RT-PCR  PD-1 gene  PD-L1 gene  PD-L2 gene
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