鸡奇异变形杆菌SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立与应用

为建立一种快速、特异、敏感的鸡奇异变形杆菌检测方法。本研究针对鸡奇异变形杆菌全基因序列设计了1对特异性引物,建立检测鸡奇异变形杆菌的SYBR GreenⅠLC-PCR检测方法,进行敏感性、特异性、重复性试验,并通过临床组织样品检测评价其临床实用性。结果显示,所建立方法的标准曲线线性关系良好,相关系数R~2=0.9957。该方法灵敏度高,可检测到稀释度为10~1 CFU/m L的奇异变形杆菌。特异性强,不与其他禽源致病原发生交叉反应。重复性试验变异系数小于2%。提示该方法可用于鸡奇异变形杆菌的监测和早期临床诊断。