银加强胶体金技术检测牛副结核病IgG_1抗体的研究

建立了胶体金标记羊抗兔ＩｇＧ检测牛副结核病ＩｇＧ１抗体的银加强胶体金技术（ＳＥＣＧＡ），其抗原包被浓度为２０μｇ／ｍＬ，被检血清稀释度为１∶１６０，被检血清、兔抗牛ＩｇＧ１、金标羊抗兔ＩｇＧ的作用时间分别为１０，２０和６０ｍｉｎ；封闭液的浓度、作用时间和作用温度分别为含２０ｇ／Ｌ明胶ｐＨ７．４的０．０１ｍｏｌ／ＬＴＢＳ，３０ｍｉｎ和３７℃；被检血清、兔抗牛ＩｇＧ１和金标羊抗兔作用之后用洗涤液洗涤时间和次数分别为每次５ｍｉｎ３次，每次５ｍｉｎ２次，每次５ｍｉｎ１次；显影时间为１５ｍｉｎ，定影时间为２ｍｉｎ；凡着色很深、呈均匀一致的灰黑色斑点，且与背景反差强者为强阳性；着色淡，与背景反差小者为弱阳性；不着色者为阴性。用本法检测３９６份疫区牛血清中抗副结核分枝杆菌ＰＰ抗原ＩｇＧ１抗体，其结果对粪便培养阳性牛的检出率为９２．３％；对粪便培养阴性牛的检出率为４．０％；经可靠的检验方法验证，本法的可信度至少达９６．０％（４４／４６）。