| 大肠杆菌多重耐药调控基因rob的原核表达及其表达蛋白多克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 陈立芳,马红霞,刘玉堂,刘树明.大肠杆菌多重耐药调控基因rob的原核表达及其表达蛋白多克隆抗体的制备[J].中国兽医科学,2010,40(5). |
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| 作者姓名： | 陈立芳 马红霞 刘玉堂 刘树明 |
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| 作者单位： | 吉林农业大学,动物科学技术学院,吉林,长春,130118 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目，吉林省科技厅项目，吉林省教育厅项目 |
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| 摘 要： | 提取阳性克隆质粒pMD18-T-rob,经SacⅠ+XhoⅠ双酶切,回收目的片段,定向克隆到pET-28a(+)原核表达载体中,提取阳性质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,获得阳性克隆。经IPTG诱导阳性菌,收集表达产物,SDS-PAGE分析证实pET-28a-rob可成功地在大肠杆菌中表达出Rob蛋白。Western-blot分析证明,Rob蛋白具有良好的反应原性。表达出的Rob蛋白经侧带法纯化后免疫獭兔3次,制备抗Rob蛋白的多克隆抗体。通过间接ELISA方法检测抗体效价,结果表明抗体血清1∶40稀释时抗体效价较高。
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| 关 键 词： | 大肠杆菌 rob基因 原核表达 多克隆抗体 |
Prokaryotic expression of multidrug resistant regulator gene rob of Escherichia coli and preparation of the polyclonal antibody against the expressed protein |
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| CHEN Li-fang,MA Hong-xia,LIU Yu-tang,LIU Shu-ming.Prokaryotic expression of multidrug resistant regulator gene rob of Escherichia coli and preparation of the polyclonal antibody against the expressed protein[J].Veterinary Science in China,2010,40(5). |
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| Authors: | CHEN Li-fang MA Hong-xia LIU Yu-tang LIU Shu-ming |
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| Institution: | CHEN Li-fang,MA Hong-xia,LIU Yu-tang,LIU Shu-ming (College of Animal Science , Technology,Jilin Agricultural University,Changchun 130118,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Escherichia coli rob gene prokaryotic expression polyclonal antibody |
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