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反向表达狂犬病病毒糖蛋白的重组伪狂犬病病毒Bartha-K61株的构建
引用本文:袁子国,张秀香,王晓虎,徐慧娟,张守峰,扈荣良.反向表达狂犬病病毒糖蛋白的重组伪狂犬病病毒Bartha-K61株的构建[J].中国兽医科学,2009,39(3).
作者姓名:袁子国  张秀香  王晓虎  徐慧娟  张守峰  扈荣良
作者单位:1. 华南农业大学兽医学院,广东,广州,510642;军事医学科学院军事兽医研究所,吉林,长春,130062
2. 吉林大学,畜牧兽医学院,吉林,长春,130062
3. 军事医学科学院军事兽医研究所,吉林,长春,130062
4. 中国科学院广州生物医药与健康研究院,广东,广州,510663
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划) 
摘    要:为构建以伪狂犬病病毒(PRV)Bartha-K61株为载体的反向表达狂犬病病毒(RV)糖蛋白(rgp)的重组活载体疫苗,将EGFP-rgp的表达框克隆入p8-AA载体的Sph Ⅰ/Nde Ⅰ酶切位点处,经酶切鉴定为反向连接,阳性重组子命名为p8AA-EGFP/rgp.在质脂体介导下将该质粒与Bartha-K61共转染PK-15细胞,获得rPRV/EGFP/rgp重组病毒.对纯化后的重组病毒进行RT-PCR、Western-blot和间接免疫荧光鉴定.结果表明,重组病毒的效价(TCID50)为108.25/mL;外源基因在细胞内得到了有效的表达,并具有良好的免疫反应性和遗传稳定性.

关 键 词:狂犬病病毒  糖蛋白  增强型绿色荧光蛋白  同源重组

Construction of a recombinant pseudorabies virus(Bartha-K61)reversely-expressing glycoprotein of rabies virus
YUAN Zi-guo,ZHANG Xiu-xiang,WANG Xiao-hu,XU Hui-juan,ZHANG Shou-feng,HU Rong-liang.Construction of a recombinant pseudorabies virus(Bartha-K61)reversely-expressing glycoprotein of rabies virus[J].Veterinary Science in China,2009,39(3).
Authors:YUAN Zi-guo  ZHANG Xiu-xiang  WANG Xiao-hu  XU Hui-juan  ZHANG Shou-feng  HU Rong-liang
Abstract:
Keywords:Bartha-K61
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