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三种贝类原虫多重PCR检测方法的建立
引用本文:谢丽基,谢芝勋,庞耀珊,刘加波,邓显文,谢志勤.三种贝类原虫多重PCR检测方法的建立[J].中国兽医科学,2009,39(12).
作者姓名:谢丽基  谢芝勋  庞耀珊  刘加波  邓显文  谢志勤
作者单位:广西兽医研究所,广西,南宁,530001 
基金项目:国家百千万人才工程人选专项资金项目,广西科技攻关项目 
摘    要:根据基因库中单孢子虫、派琴虫和马尔太虫的基因序列,分别设计了3对特异性引物,通过对多重PCR扩增条件的优化,建立了可同时检测鉴别这3种原虫的多重PCR方法.用该技术对同一样品中的单孢子虫、派琴虫和马尔太虫模板进行扩增,结果均同时得到3条大小与试验设计相符的244 bp(单孢子虫)、596 bp(派琴虫)和478 bp(马尔太虫)的特异性扩增带,对其他贝类病原核酸的扩增结果为阴性.敏感性试验结果表明,该技术最低能检测到10 pg的单孢子虫、派琴虫和马尔太虫DNA,提示该技术适用于这3种原虫的临床快速检测和鉴别诊断.

关 键 词:多重聚合酶链反应  贝类  单孢子虫  派琴虫病  马尔太虫

Development of a multiplex PCR assay for detection of three species of protozoa in shellfish
Abstract:
Keywords:multiplex polymerase chain reaction  shellfish  Haplosporidium sp    Perkinsus sp    Marteilia refringens
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