猪生殖与呼吸综合征病毒△Gp5/M/N串联基因的克隆及原核表达 |
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作者姓名: | 邵磊 冉旭华 闻晓波 倪宏波 王密 朴范泽 |
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作者单位: | 黑龙江八一农垦大学预防兽医学黑龙江省重点实验室,黑龙江大庆,163319 |
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基金项目: | 黑龙江省农垦总局攻关项目 |
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摘 要: | 采用RT-PCR方法从猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲株VR2332中扩增△Gp5、M和N基因片段,通过重组PCR方法得到串联基因△Gp5/M/N,将其克隆到原核表达载体pET-30a(+)上,并转化大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)pLysS,筛选表达PRRSV pET-△Gp5/M/N蛋白的菌株.经IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE分析和western-blotting.结果表明,PRRSV pET-△Gp5/M/N蛋白在大肠杆菌中以包涵体的形式表达,纯化后的蛋白可与PRRSV阳性血清发生特异性反应.证明原核表达系统表达的PRRSV pET-AGp5/M/N蛋白具有良好的反应原性.
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关 键 词: | 猪生殖与呼吸综合征病毒 △Gp5基因 M基因 N基因 原核表达 |
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