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CELO病毒fiber1基因部分片段的原核表达及抗原性鉴定
引用本文:王凤雪,王云峰,智海东,王玫,童光志. CELO病毒fiber1基因部分片段的原核表达及抗原性鉴定[J]. 中国兽医科学, 2005, 35(6): 468-471
作者姓名:王凤雪  王云峰  智海东  王玫  童光志
作者单位:中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001
基金项目:国家高技术研究发展计划(863)项目(2003AA213020)
摘    要:根据鸡胚致死孤儿(CELO)病毒Phelps株的fiber1基因(GenBank序列号U46933)序列设计了1对引物,采用PCR扩增CELO病毒fiber1基因C端(包含Knobs区)的部分片段,并将其克隆到质粒表达载体pGEX6p1,获得的阳性克隆命名为pGEXAF807。序列分析表明,所获得的DNA片段核苷酸序列与CELO病毒Phelps株的fiber1基因序列完全一致。将pGEXAF807转化大肠埃希氏菌DH5α,经37℃、0.6mmol/LIPTG诱导表达5h,SDSPAGE分析超声裂解后的上清和沉淀。结果显示,目的蛋白以包涵体形式存在,蛋白分子质量约为54.6ku,目的蛋白量占菌体总蛋白的35.7%。用CELO病毒多克隆血清做Westernblotting试验,结果表明目的蛋白具有较好的抗原活性。

关 键 词:CELO病毒  fiber1基因  原核表达  抗原活性
文章编号:1000-6419(2005)06-0468-04
修稿时间:2005-03-25

Cloning and expression of protein fiber1 gene of chicken embryo lethal orphan virus and identification of expressed protein antigenicity
WANG Feng-xue,WANG Yun-feng,ZHI Hai-Dong,WANG Mei,TONG Guang-zhi. Cloning and expression of protein fiber1 gene of chicken embryo lethal orphan virus and identification of expressed protein antigenicity[J]. Chinese Veterinary Science, 2005, 35(6): 468-471
Authors:WANG Feng-xue  WANG Yun-feng  ZHI Hai-Dong  WANG Mei  TONG Guang-zhi
Abstract:
Keywords:chicken embryo lethal orphan virus  fiber1 gene  prokaryotic expression  antigenicity
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