|
|||||
|
|
| 猪圆环病毒2型Cap蛋白单克隆抗体的制备与应用 | |
| 作者姓名： | 翟淑燕 陈兴慧 白娟 王先炜 姜平 |
| 作者单位： | 南京农业大学动物医学院农业部动物细菌学重点开放实验室; |
| 基金项目： | 农业行业公益项目(201003060-04,201203039);江苏省科技支撑计划项目(BE2012368);国家生猪产业技术体系专项(CARS-36);全国农业科研杰出人才与创新团队项目(C0201200632) |
| 摘 要： | 利用纯化的猪圆环病毒2型(PCV2)免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤细胞技术,筛选获得3株能稳定分泌抗PCV2蛋白抗体的杂交瘤细胞株,分别被命名为3E5、3E6和5A6。经ELISA测定,它们的培养上清的效价分别为1∶12 800、1∶1 600和1∶6 400,腹水效价分别为1∶6 400 000、1∶640 000和1∶800 000;亚类鉴定结果显示,3株单克隆抗体为IgG2a亚类,轻链为κ型;Western-blot结果显示,3株单克隆抗体均能与PCV2Cap蛋白发生特异性反应;间接免疫荧光试验(IFA)结果显示,3株单克隆抗体均能与感染PCV2的PK-15细胞产生特异性荧光反应;病毒中和试验显示,3E5和3E6具有中和活性。利用单克隆抗体3E5建立了检测PCV2抗原的夹心ELISA;它可被用于检测经β-丙内酯灭活的PCV2和杆状病毒表达系统表达的PCV2Cap蛋白。上述研究成果为PCV2感染的诊断和PCV2蛋白功能的研究提供了重要工具和手段。 |
| 关 键 词： | 猪圆环病毒型 Cap蛋白 中和活性 单克隆抗体 夹心ELISA |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ | |