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gga-miR-9*对传染性法氏囊病病毒复制的影响
作者姓名:欧阳伟  王永山  杜希宁  刘华洁  张海彬
作者单位:江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心;南京农业大学动物医学院;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;南京师范大学生命科学学院;
基金项目:国家自然科学基金项目(31272537,31302070);江苏省自然科学基金项目(BK2012787,BK20141381);江苏省农业科技自主创新基金项目(CX(13)5032)
摘    要:为研究gga-miR-9*对传染性法氏囊病病毒(IBDV)复制的影响,采用化学合成的方法合成ggamiR-9*模拟物,然后用其转染DF-1细胞,接种IBDV,分别收集上清液和细胞,测定IBDV的效价和干扰素(IFN)含量;进一步用生物信息学方法预测gga-miR-9*的靶基因,并分别用双荧光素酶报告系统、Western-blot、qRT-PCR和RNA干扰对其靶基因进行验证。结果显示,gga-miR-9*模拟物能够促进IBDV的复制,抑制IFN的产生;gga-miR-9*可靶向降解IRF2mRNA和抑制IRF2蛋白的翻译;IRF2被敲除的DF-1细胞感染IBDV后的复制效价(106.25 TCID50/0.1mL)高于miRNA阴性对照组的效价(105.25 TCID50/0.1mL)。结果表明,细胞gga-miR-9*促进IBDV复制的分子作用机理是在IRF2基因转录后水平上抑制细胞天然免疫功能而发生的。

关 键 词:传染性法氏囊病病毒  miRNA  gga-miR-*  siRNA
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