山羊痘病毒ORF014蛋白的结构预测及其真核表达 |
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作者姓名: | 卢昌 吴国华 颜新敏 赵志荀 王曼 吴娜 朱海霞 李健 张强 |
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作者单位: | 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃省生物检测工程技术研究中心; |
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基金项目: | 国家自然科学基金青年基金项目(31101802,31201892,31001056);甘肃省自然科学基金项目(1208RJZA101) |
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摘 要: | 以山羊痘病毒古浪株基因组DNA为模板,经PCR扩增,获得山羊痘病毒ORF014基因,将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1(-)/Myc-His(-)B,通过脂质体法将重组质粒转入Vero细胞,Western-blot分析目的基因表达情况。使用WabLab、SWISS-MODEL和ExPASY等在线软件预测GTPV014蛋白的功能结构域和二、三级结构以及氨基酸组成,对其作为凋亡抑制蛋白的真实性、可靠性做出理论上的判断。结果显示,重组表达载体可以在Vero细胞中表达出大小约为20ku的重组融合蛋白,该蛋白具有与黏液瘤病毒M11L蛋白相似的一些结构特征。上述结果为GTPV014蛋白在山羊痘病毒感染过程中抑制凋亡的研究提供了一些理论依据。
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关 键 词: | 山羊痘病毒 ORF基因 结构预测 真核表达 |
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