| 猪瘟病毒P7基因的原核表达及表达产物的寡聚化研究 |
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| 作者姓名： | 孙德惠 闫丹 董虎 魏衍全 敖大 王海明 孙世琪 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室;四川农业大学动物医学院动物疫病与人类健康四川省重点实验室; |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金青年科学基金项目(31101838,31100688);甘肃省科技专项(1102NKD033,1102NKD034,1104WCGA185);教育部留学归国人员科研启动基金项目;中国农业科学院基本科研业务费预算增量项目(2013ZL035) |
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| 摘 要： | 采用RT-PCR方法从接种了猪瘟疫苗的家兔脾组织中扩增出了P7基因,将其克隆到表达载体pSMK中,测序验证后转化入表达菌BL21中进行诱导表达。结果显示,重组菌可以表达出分子质量约为19ku的重组融合蛋白,经终浓度为1mmol/L的IPTG诱导2h的表达效果较好。表达产物经Ni柱纯化,可得到纯度较好的目的蛋白。纯化的蛋白置于4℃2d后进行Western-blot检测,发现有多聚体形成;戊二醛交联结果表明,P7蛋白可形成同源寡聚体。此研究结果为进一步研究猪瘟病毒P7基因表达蛋白的性质和功能奠定了基础。
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| 关 键 词： | 猪瘟病毒 P蛋白 原核表达 同源寡聚 |
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