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小反刍兽疫病毒样颗粒装配的研究
作者姓名:王秋霞  杨香芳  窦永喜  蒙学莲  欧长波  姜金庆  骆学农  王丽荣  胡建和  刘兴友  才学鹏
作者单位:河南科技学院动物科学学院;中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室;青岛易邦生物有限公司;
基金项目:现代农业产业技术体系建设专项(CARS-40-10);公益性行业(农业)科研专项(201103008);河南科技学院高层次人才科研项目(2013008)
摘    要:为了探究小反刍兽疫病毒(PPRV)是否能够装配成病毒样颗粒(VLPs),选取PPRV的4个结构蛋白(基质蛋白M、核蛋白N、血凝素蛋白H和融合蛋白F)基因,分别构建其真核表达载体,利用间接免疫荧光试验和Western-blot检测表达情况,并在Vero细胞上进行共表达,电镜下观察VLPs的装配情况。结果显示,构建的4个真核表达载体在Vero细胞上均得到了高效表达;共表达的4种蛋白在Vero细胞上成功装配并释放了PPRV VLPs,其形态和大小与PPRV Nigeria 75/1株感染细胞后观察到的病毒粒子的形态和大小一致。经免疫电镜检测,装配形成的VLPs能够识别特异性抗体。结果表明,本试验成功装配并释放了PPRV VLPs,为后续研制高效、安全的PPR新型疫苗奠定了基础。

关 键 词:小反刍兽疫病毒  结构蛋白  病毒样颗粒  装配和释放
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