| 环形泰勒虫裂殖体表面蛋白基因高免疫原性区片段的克隆及其表达 |
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| 引用本文： | 党志胜,罗建勋,蒋锡仕,黄孝玢,白启,殷宏. 环形泰勒虫裂殖体表面蛋白基因高免疫原性区片段的克隆及其表达[J]. 中国兽医科学, 2004, 34(1): 22-26 |
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| 作者姓名： | 党志胜 罗建勋 蒋锡仕 黄孝玢 白启 殷宏 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业科学院,兰州兽医研究所,甘肃,兰州,730046
2. 西南民族大学,四川,成都,610041 |
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| 基金项目： | 国家“8 6 3”项目 (2 0 0 1AA2 4 90 81)，欧盟资助项目 (ICA4 CT 2 0 0 0 30 0 2 8)，国家自然科学基金项目 (30 2 70 992 ) |
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| 摘 要： | 根据环形泰勒虫TaA12 72 1株裂殖体表面抗原 (TaSP)基因的序列设计了 1对引物 ,用PCR扩增出该基因长为 393bp的高免疫原性区片段 (SBxp)。将扩增产物连接到 pGEM TEasy载体上 ,转化入大肠埃希氏菌JM 10 9中进行克隆。随后将重组质粒 pGEM SBxp和表达载体 pGEX 4T 1分别以BamHⅠ、XhoⅠ酶切后 ,将酶切的目的片段SBxp亚克隆到原核表达载体中构建了重组表达载体 pGEX 4T 1 SBxp ,并将其转化到BL2 1宿主菌中。提取重组质粒经BamHⅠ、XhoⅠ酶切、PCR鉴定和测序确证后 ,阳性克隆用IPTG诱导表达。收集不同时间的菌液进行SDS PAGE电泳和Westernblotting检测。结果 ,SBxp基因在大肠埃希氏菌中成功表达 ,其表达产物为分子质量 4 3ku的融合蛋白 ,该产物能被牛环形泰勒虫阳性血清所识别。
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| 关 键 词： | 环形泰勒虫 表面蛋白基因 高免疫原性区 克隆 表达 |
| 文章编号： | 1000-6419(2004)01-0022-05 |
| 修稿时间： | 2003-09-04 |
Cloning and expression of hyperimmunogenic region of surface protein gene of Theileria annulata schizonts |
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| DANG Zhi-sheng. Cloning and expression of hyperimmunogenic region of surface protein gene of Theileria annulata schizonts[J]. Chinese Veterinary Science, 2004, 34(1): 22-26 |
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| Authors: | DANG Zhi-sheng |
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| Affiliation: | DANG Zhi-sheng~ |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Theileria annuata surface protein gene hyperimmunogenic region cloning expression |
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