| 猪瘟病毒E2基因与报告基因lacZ双表达质粒的构建及体外表达 |
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| 引用本文： | 冯霞,刘湘涛,孙世琪,尹双辉,尚佑军,刘在新,谢庆阁.猪瘟病毒E2基因与报告基因lacZ双表达质粒的构建及体外表达[J].中国兽医科学,2005,35(5):363-367. |
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| 作者姓名： | 冯霞 刘湘涛 孙世琪 尹双辉 尚佑军 刘在新 谢庆阁 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院,兰州兽医研究所,甘肃,兰州,730046 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863)项目(2003AA241110) |
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| 摘 要： | 利用反转录和套式PCR技术,从猪瘟病毒(CSFV)石门血毒中扩增出了E2 基因,将其用NotⅠ和XhoⅠ双酶切后,与同样处理的真核表达载体pBudCE4.1 相连,获得了pBudCE Es2 22的阳性质粒。对后者再以HindⅢ和XbaⅠ双酶切,并与来自质粒pBudCE lacZ/CAT的lacZ基因片段连接,获得了含CSFV E2基因与lacZ报告基因的真核双表达质粒pBudCE lacZ/Es2 22。该质粒转染BHK21细胞后,用βGal Staining试剂盒原位染色可见许多着染蓝色的细胞;用CSFVAntigen试剂盒检测转染细胞的上清液和细胞沉淀,均可检测到含CSFV E2 抗原。结果表明,构建的真核质粒pBudCE lacZ/Es2 22实现了2个外源基因的共表达。
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| 关 键 词： | 猪瘟病毒 E2基因 lacZ基因 真核双表达质粒 BHK21细胞 |
| 文章编号： | 1000-6419(2005)05-0363-05 |
| 修稿时间： | 2005年1月11日 |
Construction of dual-antigen-expression system of classical swine fever virus E2 gene and reported lacZ gene and their expression in vitro |
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| FENG Xia,LIU Xiang-tao,SUN Shi-qi,YIN Shuang-hui,SHANG You-jun,LIU Zai-xin,XIE Qing-ge.Construction of dual-antigen-expression system of classical swine fever virus E2 gene and reported lacZ gene and their expression in vitro[J].Veterinary Science in China,2005,35(5):363-367. |
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| Authors: | FENG Xia LIU Xiang-tao SUN Shi-qi YIN Shuang-hui SHANG You-jun LIU Zai-xin XIE Qing-ge |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | classical swine fever virus E2 gene lacZ gene eukaryotic dual antigen expression plasmid BHK21 cell |
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