奶牛乳腺炎葡萄球菌刃天青微量板快速诊断方法的建立与应用

将葡萄球菌选择培养基mBP分装96孔微量板,接种细菌纯培养、感染模拟奶样或乳腺炎阳性奶样,培养2h加入0.4g/L刃天青指示剂,继续培养至12h,根据培养基颜色变化判断细菌是否生长。细菌纯培养结果显示,此刃天青微量板能显示金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、木糖葡萄球菌、产色葡萄球菌、模仿葡萄球菌和溶血葡萄球菌生长,不能显示链球菌等非葡萄球菌生长,培养基变色时间与细菌浓度和培养时间呈正相关。模拟奶样的培养结果显示,刃天青微量板检测奶样葡萄球菌的灵敏度为1×103 CFU/mL,能在12h内获得明确的诊断结果,且能反映奶牛乳腺的葡萄球菌感染强度。乳腺炎阳性奶样的培养结果显示,刃天青微量板诊断葡萄球菌阳性奶样的符合率为98.3%(n=60),诊断葡萄球菌阴性奶样的符合率为95.0%(n=40)。这些研究结果表明,本研究建立的刃天青微量板能取代常规方法用于奶样葡萄球菌的快速诊断。