旋毛虫TspE1蛋白的原核表达与抗原性分析 |
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作者姓名: | 郝至立 梁悦 石文杰 丁静 李辰 刘明远 杨姝 刘晓雷 |
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作者单位: | 1. 吉林大学动物医学学院/人兽共患病研究教育部重点实验室;2. 解放军总医院京北医疗区清河门诊部 |
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基金项目: | 吉林省科技发展计划面上项目(20220101294JC);;吉林省自然科学基金(联合基金)项目(YDZJ202101ZYTS053); |
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摘 要: | 为进一步了解旋毛虫排泄/分泌产物中TspE1蛋白的生物学特性并评估其作为候选诊断抗原的价值,利用生物信息学方法对TspE1基因(GenBank登录号KP757896.2)编码蛋白的理化性质、亲/疏水性、跨膜区等进行预测分析。进一步将TspE1基因编码区克隆到原核表达载体pColdⅠ中,经诱导表达后采用His标签进行亲和层析纯化。纯化后获得的重组TspE1蛋白大小约36 ku。利用重组TspE1蛋白制备的多克隆抗体与不同时期的旋毛虫排泄/分泌产物进行Western-blot分析,结果显示,感染宿主30 h、3 d、6 d的旋毛虫以及肌幼虫的排泄/分泌产物中均检测出TspE1蛋白。本研究中所制备的重组TspE1蛋白能够与旋毛虫感染后第14天到第280天的猪阳性血清呈现出特异性条带,进一步证明TspE1蛋白是旋毛虫感染宿主过程中较早暴露的强抗原性蛋白质。本研究为后续旋毛虫早期诊断技术的建立提供了候选抗原。
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关 键 词: | 旋毛虫 TspE1蛋白 生物信息学 原核表达 抗原性分析 |
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