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旋毛虫TspE1蛋白的原核表达与抗原性分析
作者姓名:郝至立  梁悦  石文杰  丁静  李辰  刘明远  杨姝  刘晓雷
作者单位:1. 吉林大学动物医学学院/人兽共患病研究教育部重点实验室;2. 解放军总医院京北医疗区清河门诊部
基金项目:吉林省科技发展计划面上项目(20220101294JC);;吉林省自然科学基金(联合基金)项目(YDZJ202101ZYTS053);
摘    要:为进一步了解旋毛虫排泄/分泌产物中TspE1蛋白的生物学特性并评估其作为候选诊断抗原的价值,利用生物信息学方法对TspE1基因(GenBank登录号KP757896.2)编码蛋白的理化性质、亲/疏水性、跨膜区等进行预测分析。进一步将TspE1基因编码区克隆到原核表达载体pColdⅠ中,经诱导表达后采用His标签进行亲和层析纯化。纯化后获得的重组TspE1蛋白大小约36 ku。利用重组TspE1蛋白制备的多克隆抗体与不同时期的旋毛虫排泄/分泌产物进行Western-blot分析,结果显示,感染宿主30 h、3 d、6 d的旋毛虫以及肌幼虫的排泄/分泌产物中均检测出TspE1蛋白。本研究中所制备的重组TspE1蛋白能够与旋毛虫感染后第14天到第280天的猪阳性血清呈现出特异性条带,进一步证明TspE1蛋白是旋毛虫感染宿主过程中较早暴露的强抗原性蛋白质。本研究为后续旋毛虫早期诊断技术的建立提供了候选抗原。

关 键 词:旋毛虫  TspE1蛋白  生物信息学  原核表达  抗原性分析
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