| 鉴别ASFV野毒株与CD2v缺失株抗体检测方法的建立及应用 |
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| 作者姓名： | 王新凯 杨芷翊 朱忠武 林彦星 黄超华 王友令 曹琛福 贾伟新 |
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| 作者单位： | 1. 华南农业大学兽医学院国家非洲猪瘟区域实验室(广州)人兽共患病防控制剂国家地方联合工程实验室农业农村部人畜共患病重点实验室农业农村部兽用疫苗创制重点实验室广东省动物源性人兽共患病防控重点实验室;2. 深圳海关动植物检验检疫技术中心 |
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| 基金项目： | 广东省科技计划项目（2021B1212030015）；;广东省重点领域研发计划项目（2019B2021003）； |
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| 摘 要： | 本研究通过建立两种不同包被抗原的间接ELISA方法，旨在对ASFV野毒株与CD2v缺失株进行鉴别诊断。通过优化后的EP402R基因序列进行原核表达重组蛋白，纯化后作为包被抗原建立基于CD2v重组蛋白的间接ELISA方法；参考WOAH方法对灭活后的ASFV进行纯化，并作为包被抗原建立基于全病毒蛋白的间接ELISA方法。通过对抗原包被浓度等条件的优化，建立的基于CD2v重组蛋白的间接ELISA方法灵敏性可达1∶1 280，批内变异系数小于4.15%，批间变异系数小于9.48%；建立的基于ASFV全病毒蛋白的间接ELISA方法灵敏性可达1∶2 560，批内变异系数小于3.83%；批间变异系数小于5.04%。这两种方法均不与PRRSV、CSFV、PCV2等常见猪病阳性血清发生反应，特异性强。在96份临床猪血清样本中检出79份阴性血清、12份野毒株感染阳性血清和5份CD2v缺失株感染的阳性血清，与商品化试剂盒符合率分别达到87.5%与97.9%。本试验基于CD2v重组蛋白和ASFV全病毒蛋白建立了两种特异性强、敏感度高的间接ELISA方法，两者结合使用可以从血清学方法上区分ASFV野毒株感染和C...
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| 关 键 词： | 非洲猪瘟病毒 ELISA 鉴别诊断 |
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