猫CD3单克隆抗体的筛选与鉴定

为研究猫CD3的生物学功能、猫淋巴瘤和自身免疫性疾病的诊断及治疗方法，通过克隆构建含猫CD3胞外区基因的重组质粒，将ExpiCHO-S细胞和Expi293细胞表达的猫CD3蛋白分别作为免疫原和筛选抗原，利用杂交瘤技术制备抗猫CD3单克隆抗体（m Ab），对其抗体亚型和杂交瘤细胞株稳定性进行鉴定和分析，IFA、Western-blot、免疫组化（IHC）和流式细胞术（FCM）分析其生物学特性。结果显示，成功制备了2株可持续稳定分泌抗猫CD3 m Ab杂交瘤细胞株，命名为2C9和3E1；亚型鉴定结果显示均为Ig G1型，轻链类型均为κappa型。IFA和Western-blot结果显示，2株抗猫CD3 m Ab均可与体外表达的猫CD3蛋白发生特异性结合。IHC和FCM结果显示只有2C9 m Ab可特异性识别猫脾、肠道淋巴组织及猫外周血单核淋巴细胞（PBMCs）中的T淋巴细胞。结果表明，本研究制备的猫CD3 m Ab为后续猫CD3分子的功能研究、猫淋巴瘤和自身免疫性疾病的诊断及治疗方法的建立奠定了基础。