猪鼻支原体荧光PCR检测方法的建立和应用

为了建立猪鼻支原体（Mycoplasma hyorhinis）快速荧光PCR检测方法，本研究合成了该病原特异性基因P37的重组质粒，根据该基因设计荧光PCR引物和探针，并对设计的引物和探针的特异性、敏感性和重复性进行了检测。结果显示，该方法具有高度的特异性，除了识别猪鼻支原体基因组外，对猪的基因组和猪常见病原的基因组均不发生交叉反应。在敏感性和重复性试验中，该方法对猪鼻支原体的检测限为1 000copies/m L，变异系数小于3%，因此具有优良的敏感性和稳定性。用该方法检测临床样本，阳性检出率为76%(38/50)，远高于普通PCR的阳性检出率（40%,20/50）。上述结果表明，本研究建立的荧光PCR方法在特异性、敏感性和稳定性方面均满足猪鼻支原体的临床检测要求，可以用于猪鼻支原体临床样品的检测。