猫细小病毒和猫疱疹病毒1型双重TaqMan探针荧光定量PCR检测方法的建立与应用

为建立同时检测猫细小病毒（FPV）和猫疱疹病毒1型（FHV-1）的双重荧光定量PCR方法，针对FPV的VP2基因、FHV-1的UL21基因设计特异性引物和TaqMan探针，通过优化反应条件，建立了双重荧光定量PCR方法，并绘制了标准曲线，其相关系数（R2）均为0.999，具有良好的线性关系。结果显示，FPV、FHV-1最低检测限分别为4.87和2.21 copies/μL；对猫的常见病毒及细菌均无非特异反应；批内、批间试验的变异系数均小于2%。证明该方法灵敏度高、特异性强、重复性好。用建立的方法对178份样本进行检测，结果，FPV和FHV-1的阳性检出率分别为73.65%和16.85%，二者混感阳性率为15.73%，与临床确诊结果一致。上述结果表明，本研究建立的方法可用于FPV、FHV-1感染的早期诊断、定量检测和流行病学调查等。