| 摘 要： | MGF360-9L是非洲猪瘟病毒（African swine fever virus,ASFV）重要的毒力基因，本实验室前期使用免疫共沉淀和液相色谱-质谱（IP-MS）联合技术，明确了MGF360-9L和宿主蛋白自噬/苄氯素1调节因子1(autophagy/beclin-1 regulator 1,Ambra 1)具有相互作用，现有的研究已经证实宿主蛋白Ambra 1在病原感染中发挥重要作用。为明确Ambra 1介导MGF360-9L对ASFV复制的调控作用及其机制，本研究构建Ambra 1真核表达质粒，使用免疫共沉淀（Co-immunoprecipitation,Co-IP）和间接免疫荧光（indirect immunofluorescence assay,IFA）技术，验证了Ambra 1和MGF360-9L的互作及互作区域。设计并合成Ambra 1的RNA干扰（RNAi）序列，运用实时荧光定量PCR(real-time q PCR,RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹（Western-blot）技术，证明了Ambra 1过表达抑制ASFV的复制，下调Ambra 1的表达则能够促进AS...
|
