水牛匈爱病毒结构蛋白VP1的截短表达及多克隆抗体的制备 |
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作者姓名: | 邹延林 张广欣 罗宇航 朱鑫玥 刘黄豪 莫筱可 谢江 王小玲 陈樱 欧阳康 韦祖樟 覃一峰 潘艳 黄伟坚 |
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作者单位: | 1. 广西大学动物科学技术学院;2. 广西农业职业技术大学 |
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基金项目: | 国家重点研发计划项目(2021YFD1100100);;国家现代农业产业技术体系广西牛羊产业创新团队建设项目(nycytxgxcxtd-2021-09); |
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摘 要: | 为了制备水牛匈爱病毒(BufHuV)结构蛋白VP1截短基因的多克隆抗体,将病毒的VP1截短基因克隆至原核表达载体pET-32a(+)获得重组质粒pET-32a-BufHuV-VP1,重组质粒转化至BL21感受态细胞(DE3)后诱导表达,VP1截短蛋白的分子质量约为31.5 ku,主要以包涵体的形式表达。以纯化好的重组蛋白免疫昆明小鼠以制备多克隆抗体,通过Western-blot与IFA鉴定其特异性。结果显示,制备的小鼠多克隆抗体能与纯化的VP1重组截短蛋白和感染BufHuV的细胞表达的VP1特异性结合,表明多克隆抗体具有良好的反应原性和特异性。水牛匈爱病毒VP1截短重组蛋白及其多克隆抗体的成功制备为研究BufHuV致病机制、VP1蛋白功能以及血清学检测方法的建立提供了材料基础。
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关 键 词: | 牛匈爱病毒 结构蛋白 原核表达 多克隆抗体 |
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