猫泛白细胞减少症病毒的分离鉴定及其结构蛋白VP2可溶性表达的调控 |
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作者姓名: | 刘丽春 徐国伟 茹毅 李亚军 杨明星 梁超 刘晓飞 张世栋 李建喜 王学智 孙研 周雨霞 |
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作者单位: | 1. 内蒙古农业大学兽医学院;2. 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所;3. 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
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基金项目: | 甘肃省青年科技基金项目(21JR7RA035); |
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摘 要: | 为了研究猫泛白细胞减少症病毒(FPV)的生物学特性,可溶性表达FPV结构蛋白,研发基于VP2的新型亚单位疫苗,采集40份疑似FPV阳性的中华田园猫粪便样本,通过qPCR对样本检测后利用细胞培养、血凝试验、PCR和电镜观察等试验鉴定分离株,并对其VP2基因进行同源性比对。同时,构建pET-28aVP2、pET-28a-SUMO-VP2和pET-22a-SUMO-VP2重组质粒并利用大肠杆菌进行表达。结果显示,成功分离出1株FPV毒株;生物信息学分析表明,该毒株的VP2基因与此前报道的毒株同源性高达99%。蛋白表达结果显示,单独使用SUMO标签对VP2蛋白的可溶性表达影响较低;然而,当带有SUMO标签的重组质粒与4个分子伴侣(p G-KJE8、pGro7、pKJE7、pTf16)分别共表达时,可溶性VP2的表达量可显著提高。该研究可为FPV亚单位疫苗研发提供数据和有效的生物材料。
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关 键 词: | 猫泛白细胞减少症病毒 中华田园猫 SUMO标签 分子伴侣 亚单位疫苗 |
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