| ASFV和PRRSV多重TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用 |
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| 作者姓名： | 赵硕 陈忠伟 肖婷 何颖 张宁 覃国喜 卢冰霞 段振华 秦毅斌 张胜斌 段群棚 赵武 韦明宇 |
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| 作者单位： | 1. 广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室农业农村部中国(广西)-东盟跨境动物疫病防控重点实验室;2. 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室;3. 广西农垦永新畜牧集团金光有限公司;4. 玉林市动物疫病预防控制中心;5. 广西农垦永新畜牧集团西江有限公司;6. 广西农垦永新畜牧集团有限公司 |
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| 基金项目： | 南宁市科学研究与技术开发计划项目（20222043）；;玉林市科学研究与技术开发计划项目（玉市科20220515,20220516）；;贵港市科学研究与技术开发计划项目（桂科计2117003,202203011）； |
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| 摘 要： | 为了建立一种可同时精准、快捷鉴别检测非洲猪瘟病毒(ASFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的方法，本研究选择猪源β-actin为内参基因，根据ASFV的P72基因及PRRSV的ORF6基因设计特异性引物及TaqMan探针，通过优化反应条件，建立了ASFV和PRRSV多重TaqMan荧光定量PCR检测方法，对该方法的特异性、敏感性、重复性进行验证，并初步应用于临床样品的检测。结果显示，该方法可在45 min内完成对ASFV、PRRSV及猪源β-actin基因的特异性扩增；对ASFV、PRRSV及猪源β-actin标准品模板的最低检测拷贝数分别为7.87×101 copies/μL、1.19×102 copies/μL和5.99×103copies/μL，同一模板的3次重复试验的组内及组间变异系数均小于2%；用该方法检测92份临床样品，未检出ASFV，检出19份PRRSV阳性样品。结果表明，本研究建立了一种可快速鉴别检测ASFV及PRRSV的多重荧光定量PCR方法，较普通PCR敏感性高103倍，可应用于ASFV和PR...
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| 关 键 词： | 非洲猪瘟病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 多重TaqMan荧光定量PCR |
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