非洲猪瘟病毒荧光量子点检测试纸条的研制 |
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作者姓名: | 徐志远 施远国 陈兵 孙洁 周华亮 秦智锋 刘宵 娄华 |
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作者单位: | 1. 佛山科学技术学院;2. 深圳市动物疫病预防控制中心;3. 深圳海关动植物检验检疫技术中心;4. 深圳湾海关 |
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基金项目: | 国家重点研发计划项目(2016YFD0501103); |
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摘 要: | 根据非洲猪瘟病毒(ASFV)VP72蛋白的氨基酸序列筛选合成多肽,并与载体蛋白BSA进行偶联,将以此得到的多肽作为抗原免疫小鼠,用来制备鼠源抗ASFV VP72蛋白的单克隆抗体。将上述方法制备的针对ASFV VP72蛋白的单抗作为荧光量子点标记的抗体,以与这种标记单抗互相配对的另一单抗包被检测线(T线),采用山羊抗鼠二抗Ig G包被质控线(C线),建立了一种简便、快速、准确的用于ASFV抗原检测的荧光量子点免疫层析试纸条。结果表明,制备的试纸条对于猪瘟等8种猪常见疫病免疫用灭活疫苗检测时无交叉反应;可检测到8μg/m L的VP72重组蛋白;与商品化的ASFV荧光定量PCR检测试剂盒进行比对检测,其对临床样品检测的阳性符合率为82.1%(23/28),阴性符合率为93.8%(75/80)。该试纸条特异性好、灵敏度高以及稳定性好,为ASFV的现场快速初步诊断提供了一种技术支持。
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关 键 词: | 非洲猪瘟病毒 VP72 单克隆抗体 荧光量子点 试纸条 |
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