禽多瘤病毒TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用 |
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作者姓名: | 闫佳佳 翟天舒 许冠龙 王嘉 孔冬妮 邓永 汪溪 薛青红 程佳 毛娅卿 印春生 |
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作者单位: | 1. 山西农业大学动物医学学院;2. 中国兽医药品监察所;3. 江西农业大学动物科学技术学院 |
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基金项目: | 国家自然科学基金青年科学基金项目(32002273); |
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摘 要: | 为建立检测禽多瘤病毒(avian polyomavirus,APV)的快速诊断方法,根据APV VP4基因的保守序列设计并合成引物和探针,建立了TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法,验证了其特异性、敏感性和重复性,并利用建立的方法对采集的临床样本组织进行检测。结果显示,建立的TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法的Ct值与标准品在1.0×109~1.0×102copies/μL范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.996,斜率为-3.021,检测下限为1.0×101copies/μL,与其他禽源病毒未发生交叉反应,重复性试验的变异系数均小于2%,重复性好,并且该方法在实际临床检测中可行。上述结果表明,建立的方法可用于禽多瘤病的早期诊断和APV快速检测。
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关 键 词: | 禽多瘤病毒 VP4基因 TaqMan探针实时荧光定量PCR |
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