摘 要: | 本文旨在建立血液和尿液中西地那非及3种主要代谢产物(N-去甲基西地那非、去乙烷西地那非和哌嗪-N-去烷基西地那非)的超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-MS/MS)分析方法,并通过动物实验收集其血液和尿液作为待测样本对该方法加以验证。取血液或尿液200μL,以西地那非-d8为内标,加800μL乙腈沉淀蛋白。选用Waters BEH C18(2.1 mm×100 mm×1.7μm)色谱柱,流动相以0.01%甲酸水(2 mmol/L甲酸铵)为A相,乙腈为B相,梯度洗脱分离。质谱仪采用电喷雾离子源,正离子模式进行分析。该方法在血液和尿液中西地那非及3种主要代谢产物的检出限均可达到2 ng/mL;血添加样品中西地那非及其3种主要代谢物在5~1 000 ng/mL之间线性关系均良好(r≥0.997);尿添加样品中西地那非、N-去甲基西地那非和去乙烷西地那非在5~5 000 ng/mL之间线性关系良好(r≥0.997),哌嗪-N-去烷基西地那非在5~1 000ng/mL之间线性关系良好(r=0.999);血液和尿液中西地那非、N-去甲基西地那非、去乙烷西地那非和哌嗪-N-去烷基西地那非的提取回收率...
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