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马动脉炎病毒膜蛋白基因截短型的克隆及其在大肠埃希氏菌中的表达
引用本文:杜建,王志亮,宋厚辉,金宁一,张念祖. 马动脉炎病毒膜蛋白基因截短型的克隆及其在大肠埃希氏菌中的表达[J]. 中国兽医科学, 2005, 35(3): 181-185
作者姓名:杜建  王志亮  宋厚辉  金宁一  张念祖
作者单位:1. 农业部动物检疫所,国家外来动物疫病诊断中心,山东,青岛,266032;昆明市畜牧兽医站,云南昆明,650223
2. 农业部动物检疫所,国家外来动物疫病诊断中心,山东,青岛,266032
3. 中国科学院,微生物研究所,北京,100088
4. 解放军军需大学,病毒基因工程重点实验室,吉林,长春,130062
5. 农业部热带亚热带动物病毒学重点实验室,云南,昆明,650224
摘    要:根据马动脉炎病毒膜蛋白(M)的核苷酸序列,设计合成了 1 对引物,从 pUC 18 M质粒中扩增出截短的膜蛋白M基因片段。对该片段及 pGEX 6P 1 载体双酶切并连接,成功构建了原核表达载体pGEX 6P Mt。将此重组质粒转化BL21(DE3)宿主菌,对培养条件及诱导表达条件等影响表达的因素进行了优化;诱导后菌体裂解物经 SDS PAGE分析发现,在约 34 ku处出现了 1条特异性的蛋白条带,其分子质量与预期的M截短蛋白的分子质量相符,并随着诱导时间的延长而变化,在诱导后4 h达到高峰。结果表明,膜蛋白 M基因截短型在大肠埃希氏菌中得到了高效表达。

关 键 词:马动脉炎病毒  膜蛋白基因  原核表达载体
文章编号:1000-6419(2005)03-0181-05
修稿时间:2004-11-03

Cloning of truncated membrane protein gene of equine arteritis virus and its expression in Escherichia coli
DU Jian,WANG Zhi-liang,SONG Hou-hui,JIN Ning-yi,ZHANG Nian-zu. Cloning of truncated membrane protein gene of equine arteritis virus and its expression in Escherichia coli[J]. Chinese Veterinary Science, 2005, 35(3): 181-185
Authors:DU Jian  WANG Zhi-liang  SONG Hou-hui  JIN Ning-yi  ZHANG Nian-zu
Abstract:
Keywords:equine arteritis virus  membrane protein gene  prokaryotic expression vector
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