| Asia 1型口蹄疫病毒多抗原表位真核表达质粒的构建及表达 |
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| 引用本文： | 张攀,张永光,王永录,潘丽,胡文发,唐华,方玉珍,蒋守田,吕建亮,周鹏,张中旺,刘新生.Asia 1型口蹄疫病毒多抗原表位真核表达质粒的构建及表达[J].中国兽医科学,2013(8):771-775. |
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| 作者姓名： | 张攀 张永光 王永录 潘丽 胡文发 唐华 方玉珍 蒋守田 吕建亮 周鹏 张中旺 刘新生 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863)项目(2011AA10A211);甘肃省国际科技合作计划项目(1011WCGA160);家畜疫病病原生物学国家重点实验室自主研究课题(SKLVEB2008ZZKT008) |
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| 摘 要： | 为了构建Asia 1型口蹄疫病毒多抗原表位真核表达质粒,采用多表位基因串联策略,合成包括口蹄疫病毒T细胞和B细胞表位基因的基因片段F,该基因片段由结构蛋白VP1上的2个B细胞表位(VP1135-159aa、VP1194-211aa)基因、非结构蛋白3A和3D上的T细胞表位(3A21-35aa、3D795-803aa)基因组成。利用限制性内切酶HindⅢ、XbaⅠ将基因片段F克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)。经酶切鉴定、序列分析正确后,利用LipofectamineTM2000将阳性重组质粒pc-F转染至BHK-21细胞。Western-blot和IFA分析结果显示,所表达的蛋白大小约25.4ku,能够与Asia 1型口蹄疫病毒标准兔抗血清发生特异性反应,证实所表达的蛋白具有较好的反应原性。结果表明,Asia 1型口蹄疫病毒多抗原表位真核表达质粒pc-F构建成功,且能在BHK-21细胞中正确表达。
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| 关 键 词： | Asia 1型口蹄疫病毒 多抗原表位 BHK-21细胞 表达 |
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