| 猪IL-18基因的原核表达及重组蛋白的纯化 |
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| 引用本文： | 裴仉福,陈瑞爱,温纳相,唐秀英,唐满华,朱文冠,李琳,程含波. 猪IL-18基因的原核表达及重组蛋白的纯化[J]. 中国兽医科学, 2006, 36(10): 842-846 |
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| 作者姓名： | 裴仉福 陈瑞爱 温纳相 唐秀英 唐满华 朱文冠 李琳 程含波 |
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| 作者单位： | 1. 广东大华农动物保健品有限公司,广东,新兴,527439
2. 广东温氏食品集团有限公司,广东,新兴,527439 |
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| 摘 要： | 以pcDNA3.1-pIL-18为模板,采用PCR技术扩增到了猪白细胞介素18(IL-18)的成熟蛋白基因,通过KpnⅠ SacⅠ双酶切及连接反应,构建了pET32c-pIL-18原核表达质粒。经过限制性内切酶分析、PCR鉴定及DNA序列测定证实,重组质粒中的基因片段连接正确。之后,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),于37℃、1.0 mmol/L IPTG条件下诱导表达。菌体裂解产物经SDS-PAGE分析,在分子质量约为33 ku处出现了预期的目的蛋白。用8 mol/L脲对表达产物变性,经Ni2 -NTA柱纯化,透析复性,得到了纯化的IL-18蛋白。Western-blot分析证实,纯化的重组IL-18蛋白具有反应活性。上述研究结果为重组IL-18的应用奠定了基础。
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| 关 键 词： | 猪白细胞介素-18基因 原核表达 蛋白纯化 |
| 文章编号： | 1673-4696(2006)10-0842-05 |
| 修稿时间： | 2006-07-19 |
Prokaryotic expression of porcine interleukin-18 gene and purification of the expressed IL-18 protein |
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| PEI Zhang-fu,CHEN Rui-ai,WEN Na-xiang,TANG Xiu-ying,TANG Man-hua,ZHU Wen-guan,LI Lin,CHENG Han-bo. Prokaryotic expression of porcine interleukin-18 gene and purification of the expressed IL-18 protein[J]. Chinese Veterinary Science, 2006, 36(10): 842-846 |
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| Authors: | PEI Zhang-fu CHEN Rui-ai WEN Na-xiang TANG Xiu-ying TANG Man-hua ZHU Wen-guan LI Lin CHENG Han-bo |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | porcine interleukin-18 gene prokaryotic expression protein purification |
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