牛型布鲁氏菌A19株外膜蛋白OMP2b的表达及鉴定 |
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引用本文: | 何亮,韩先干,胡青海,丁铲,于圣青. 牛型布鲁氏菌A19株外膜蛋白OMP2b的表达及鉴定[J]. 中国兽医科学, 2010, 40(9) |
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作者姓名: | 何亮 韩先干 胡青海 丁铲 于圣青 |
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作者单位: | 何亮(中国农业科学院上海兽医研究所,上海,200241;扬州大学,兽医学院,江苏,扬州,225009);韩先干,胡青海,丁铲,于圣青(中国农业科学院上海兽医研究所,上海,200241) |
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基金项目: | 国家重点基础研究发展计划(973)项目,中央级科研院所公益性研究专项 |
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摘 要: | 根据GenBank中的牛型布鲁氏菌基因序列,设计了1对特异性引物,以A19菌株基因组DNA为模板,通过PCR扩增出外膜蛋白OMP2b的全长基因,将OMP2b经T-A克隆后进行了序列测定和分析。结果表明,OMP2b全长1 128bp,编码376个氨基酸。将OMP2b定向克隆至表达载体pCold TF中,构建重组表达质粒pCold TF-OMP2b,转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下表达融合蛋白His-OMP2b。SDS-PAGE分析结果显示,His-OMP2b约为93ku,与预期大小一致,表明His-OMP2b表达成功;经Wes-tern-blot分析,His-OMP2b能与牛型布鲁氏菌A19株全菌兔抗血清发生特异性反应,表明His-OMP2b具有免疫反应性。
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关 键 词: | 牛型布鲁氏菌 外膜蛋白2b 蛋白表达 免疫印迹 |
Expression and identification of outer membrane protein 2b(OMP2b)of Brucella abortus strain A19 |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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