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鸡毒支原体醛缩酶的原核表达及膜定位鉴定
引用本文:何随彬,谭磊,包世俊,郭小琴,仇旭升,宋翠萍,费荣梅,丁铲. 鸡毒支原体醛缩酶的原核表达及膜定位鉴定[J]. 中国兽医科学, 2013, 0(1): 42-46
作者姓名:何随彬  谭磊  包世俊  郭小琴  仇旭升  宋翠萍  费荣梅  丁铲
作者单位:南京农业大学动物医学院;中国农业科学院上海兽医研究所;甘肃农业大学动物医学院
基金项目:国家自然科学基金项目(30871883);公益性行业(农业)科研专项(201003012)
摘    要:为了探明醛缩酶在支原体中的定位,根据已发表的鸡毒支原体醛缩酶(fba)基因序列设计特异性的引物,以鸡毒支原体Rlow株基因组为模板,通过Overlap PCR点突变扩增鸡毒支原体醛缩酶fba基因,将fba克隆至pET-28a(+)载体后进行序列测定和分析。结果表明,fba基因全长873bp,编码290个氨基酸。将构建的重组表达质粒pET28a-fba转化至大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下成功获得表达融合蛋白rMGfba,大小约为33ku。纯化蛋白并对蛋白进行酶活性检测,结果显示该酶在体外具有与阳性对照醛缩酶相同的催化功能。用该蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体,提取鸡毒支原体膜蛋白,Western-blot分析结果显示FBA多抗可与疏水性膜蛋白特异性结合,说明FBA位于鸡毒支原体膜表面。

关 键 词:鸡毒支原体  醛缩酶  原核表达  酶活性  膜定位

Prokaryotic expression and membrane localization of aldolase of Mycoplasma gallisepticum
HE Sui-bin,TAN Lei,BAO Shi-jun,GUO Xiao-qin,QIU Xu-sheng,SONG Cui-ping,FEI Rong-mei,DING Chan. Prokaryotic expression and membrane localization of aldolase of Mycoplasma gallisepticum[J]. Chinese Veterinary Science, 2013, 0(1): 42-46
Authors:HE Sui-bin  TAN Lei  BAO Shi-jun  GUO Xiao-qin  QIU Xu-sheng  SONG Cui-ping  FEI Rong-mei  DING Chan
Affiliation:1.College of Veterinary Medicine,Nanjing Agricultural University,Nanjing 210095,China;2.Shanghai Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Shanghai 200241,China;3.College of Veterinary Medicine,Gansu Agricultural University,Lanzhou 730070,China)
Abstract:
Keywords:
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