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猪圆环病毒2型猪伪狂犬病病毒和猪细小病毒三重PCR检测方法的建立
引用本文:方立,徐辉,陈伟杰,赵灵燕,倪柏锋,方维焕. 猪圆环病毒2型猪伪狂犬病病毒和猪细小病毒三重PCR检测方法的建立[J]. 中国兽医科学, 2005, 35(12): 954-958
作者姓名:方立  徐辉  陈伟杰  赵灵燕  倪柏锋  方维焕
作者单位:1. 浙江大学,动物预防医学研究所,浙江省重点实验室,浙江,杭州,310029;浙江省畜牧兽医局,浙江,杭州,310020
2. 浙江省畜牧兽医局,浙江,杭州,310020
3. 浙江大学,动物预防医学研究所,浙江省重点实验室,浙江,杭州,310029
基金项目:浙江省科技攻关计划重点项目(2005C22032)
摘    要:针对猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2、猪伪狂犬病病毒(PRV)gD和猪细小病毒(PPV)VP2基因保守区域,设计了特异性引物,在分别建立单一病毒基因PCR检测方法的基础上,通过对3组引物的比例和浓度、dNTPs和Mg2 浓度、退火温度等条件的优化,建立了针对上述3种病毒的三重PCR检测方法。敏感性试验表明,应用该方法最低可检测到4×10-4ng/μL的PRV双链DNA模板和2×10-5ng/μL的PCV2和PPV单链DNA模板。对21份自然感染病猪样品的检测结果表明,该三重PCR检测结果与单一PCR检测的结果完全符合。试验结果显示,建立的三重PCR方法可用于3种DNA病毒的同时检测,具有快速、准确的特点,有临床应用前景。

关 键 词:猪圆环病毒2型  猪伪狂犬病病毒  猪细小病毒  三重PCR
文章编号:1000-6419(2005)12-0954-05
修稿时间:2005-10-28

Development of a triplex PCR assay for detection of porcine circovirus type 2, pseudorabies virus and porcine parvovirus
FANG Li,XU Hui,CHEN Wei-jie,ZHAO Ling-yan,NI Bai-feng,FANG Wei-huan. Development of a triplex PCR assay for detection of porcine circovirus type 2, pseudorabies virus and porcine parvovirus[J]. Chinese Veterinary Science, 2005, 35(12): 954-958
Authors:FANG Li  XU Hui  CHEN Wei-jie  ZHAO Ling-yan  NI Bai-feng  FANG Wei-huan
Abstract:
Keywords:porcine circovirus type 2  pseudorabies virus  porcine parvovirus  triplex PCR  
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