| H5N1亚型高致病性禽流感病毒NP基因在昆虫细胞中的表达及其表达产物的生物学活性 |
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| 引用本文： | 万春和,刘明,刘春国,杨涛,刘大飞,齐金龙,陈浩,杜金铃,李洪涛.H5N1亚型高致病性禽流感病毒NP基因在昆虫细胞中的表达及其表达产物的生物学活性[J].中国兽医科学,2008,38(5):380-385. |
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| 作者姓名： | 万春和 刘明 刘春国 杨涛 刘大飞 齐金龙 陈浩 杜金铃 李洪涛 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所,农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001 |
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| 基金项目： | 黑龙江省自然科学基金
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国家科技支撑计划 |
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| 摘 要： | 根据GenBank上登录的H5N1亚型高致病性禽流感病毒(HPAIV)核蛋白(NP)基因序列设计引物,通过PCR扩增出A/Goose/HLJ/QFY/04(H5N1)毒株的NP基因片段,将其克隆到pFastBacGP67B杆状病毒载体上,将筛选的阳性重组转座载体pFastBacGP67B-NP转化至含有杆状病毒穿梭载体的DH10Bac感受态细胞,经蓝白斑筛选和PCR鉴定,构建了杆状病毒表达载体,获得了重组转座子(rBacmid-NP),在脂质体介导下转染对数生长期的Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒(rBv-NP).SDS-PAGE分析、Westernblotting检测、免疫组化分析和ELISA试验结果表明,分子质量约为54 ku的重组核蛋白得到了高效表达,该表达蛋白具有良好的生物学活性.
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| 关 键 词： | 禽流感病毒 核蛋白基因 昆虫细胞杆状病毒表达 亚型 高致病性禽流感 病毒 基因 昆虫细胞 表达蛋白 生物学活性 expressed product biological activities identification insect cells subtype avian influenza virus gene 高效表达 重组核蛋白 分子质量 结果 试验 ELISA |
| 文章编号： | 1673-4696(2008)05-0380-06 |
| 修稿时间： | 2007年11月19 |
Expression of NP gene of highly pathogenic avian influenza virus subtype H5N1 in insect cells and identification of biological activities of the expressed product |
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| WAN Chun-he,LIU Ming,LIU Chun-guo,YANG Tao,LIU Da-fei,QI Jin-long,CHEN Hao,DU Jin-ling,LI Hong-tao.Expression of NP gene of highly pathogenic avian influenza virus subtype H5N1 in insect cells and identification of biological activities of the expressed product[J].Veterinary Science in China,2008,38(5):380-385. |
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| Authors: | WAN Chun-he LIU Ming LIU Chun-guo YANG Tao LIU Da-fei QI Jin-long CHEN Hao DU Jin-ling LI Hong-tao |
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