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15重快速STR复合扩增体系的构建
引用本文:韩俊萍,孙敬,欧元,刘鹏,叶健,赵雯雯,王雪倩,张译文,刘耀. 15重快速STR复合扩增体系的构建[J]. 法医学杂志, 2016, 0(1): 49-53. DOI: 10.3969/j.issn.1004-5619.2016.01.011
作者姓名:韩俊萍  孙敬  欧元  刘鹏  叶健  赵雯雯  王雪倩  张译文  刘耀
作者单位:1. 中国人民公安大学刑事科学技术学院,北京,100038;2. 公安部物证鉴定中心北京市现场物证检验工程技术研究中心,北京100038;公安部物证鉴定中心法医遗传学公安部重点实验室,北京100038;3. 清华大学医学系统生物学研究中心,北京,100084
基金项目:中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金计划(2012JB012),公安部技术研究计划(2014JSYJA011)
摘    要:目的建立一套15重快速STR复合扩增体系。方法选择14个常染色体基因座以及1个性别基因座,采用Fast Start Taq DNA聚合酶系统,以DNA标准品9947A为模板,通过筛选扩增条件、选择热启动酶用量、调整引物平衡、优化快速扩增程序、筛选反应缓冲液、选择反应体系以及筛选添加剂等一系列复合扩增实验,比较各条件下等位基因丢失和非特异性扩增情况。结果在以1 ng DNA为模板、0.4μL聚合酶及10×Fast Start高保真反应缓冲液构成10μL快速体系的条件下,32 min即可获得标准DNA全部15个STR基因座的完整分型,无等位基因丢失和非特异性扩增现象,等位基因均衡性良好。同时,5%甘油、0.01%明胶、0.05%明胶和5 mmol/L硫酸铵可作为PCR扩增过程中拟加入的反应添加剂。结论本研究建立的15重快速STR复合扩增体系可以明显缩短反应时间,提高样品检测效率。

关 键 词:法医遗传学  短串联重复序列  聚合酶链反应  体系建立

Construction of a 15-plex Rapid STR Multiplex Amplification System
Abstract:
Keywords:forensic genetics  short tandem repeat  polymerase chain reaction  system establishment
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