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PRRSV兰州分离株ORF3和ORF5基因的克隆与序列分析及其杆状病毒表达载体的构建
引用本文:赵娜,田宏,吴锦艳,祁燕蓉,满自萍,尚佑军,何生虎,刘湘涛. PRRSV兰州分离株ORF3和ORF5基因的克隆与序列分析及其杆状病毒表达载体的构建[J]. 中国兽医科学, 2009, 39(3)
作者姓名:赵娜  田宏  吴锦艳  祁燕蓉  满自萍  尚佑军  何生虎  刘湘涛
作者单位:1. 中国农业科学院兰州兽医研究所国家口蹄疫参考实验室家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室,甘肃,兰州,730046;宁夏大学农学院,宁夏,银川,750021
2. 中国农业科学院兰州兽医研究所国家口蹄疫参考实验室家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室,甘肃,兰州,730046
3. 宁夏大学农学院,宁夏,银川,750021
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划),国家科技支撑计划 
摘    要:根据GenBank中猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)中国代表株CH-1a的基因组序列,设计包含完整ORF3、ORF5基因序列的2对特异引物,利用RT-PCR技术扩增PRRSV兰州分离株(Lanzhou株)的ORF3和ORF5基因,并对其进行序列测定,同时与已发表的13株PRRSV进行同源性比较.将扩增的PRRSV Lanzhou株ORF3、ORF5基因分别克隆到杆状病毒表达载体pFastBacHTA上,将经酶切及测序鉴定的阳性重组质粒pFastBacHTA-ORF3、pFastBaeHTA-ORF5分别转化到DH10Bac感受态细胞.结果显示,ORF3、ORF5基因长度分别为765 bp、603 bp,发现核苷酸的同源性分别为88.0%~99.2%、87.3%~99.0%,获得了重组转座子rBacmid-ORF3、rBacmid-ORF5.

关 键 词:猪生殖与呼吸综合征病毒  ORF3基因  ORF5基因  克隆  杆状病毒表达载体

Cloning and sequence analysis of ORF3 and ORF5 genes of PRRSV Lanzhou strain and construction of their baculovirus expression vectors
ZHAO Na,TIAN Hong,WU Jin-yan,QI Yan-rong,MAN Zi-ping,SHANG You-jun,HE Sheng-hu,LIU Xiang-tao. Cloning and sequence analysis of ORF3 and ORF5 genes of PRRSV Lanzhou strain and construction of their baculovirus expression vectors[J]. Chinese Veterinary Science, 2009, 39(3)
Authors:ZHAO Na  TIAN Hong  WU Jin-yan  QI Yan-rong  MAN Zi-ping  SHANG You-jun  HE Sheng-hu  LIU Xiang-tao
Abstract:
Keywords:
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