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芪玉三龙汤调节小鼠腹腔巨噬细胞M2/M1型极化及其对CD4+、CD8+T细胞的影响
作者姓名:兰 煜  范国栋  王 婷  吴 欢  李泽庚  李 平  陈 杨
作者单位:1.安徽中医药大学,安徽 合肥 230012;2.安徽医科大学第一附属医院中西医结合肿瘤科,安徽 合肥 230022;3.安徽中医药大学第一附属医院,安徽 合肥 230031
基金项目:国家自然科学基金项目(82004314);安徽医科大学第一附属医院临床研究启动计划(LCYJ2021YB017);CSCO-罗氏实体肿瘤研究基金(Y-Roche2019/2-0079)
摘    要:目的 探讨芪玉三龙汤在体外条件下对小鼠腹腔巨噬细胞M2/M1型极化的调控作用及其对CD4+T、CD8+T细胞的影响。方法 分离培养小鼠腹腔巨噬细胞,并通过流式细胞术(PE-CD11b/和FITC-F4/80染色)鉴定其纯度。采用白细胞介素(interleukin,IL)-4刺激小鼠腹腔来源的巨噬细胞构建M2型巨噬细胞模型,芪玉三龙汤处理M2型巨噬细胞,分别于不同时间点应用流式细胞术检测细胞表面膜分子CD16/32、CD206、CD155、PD-L1、Galectin-9的表达水平;qRT-PCR检测诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、IL-12p40、IL-1β、精氨酸酶1(arginase1,Arg1)、FIZZ1、IL-10 mRNA的表达水平。采用芪玉三龙汤处理后的M2型巨噬细胞分别与CD4+、CD8+T细胞体外共培养,流式细胞术检测TIGIT的表达水平。结果 成功分离出小鼠腹腔巨噬细胞,并鉴定其纯度高达89.8%。芪玉三龙汤处理M2型巨噬细胞后,细胞表面膜分子CD16/32的表达水平升高,而CD206表达水平降低;处理24 h后细胞iNOS、IL-12p40及IL-1β mRNA表达水平上升,Arg-1、FIZZ-1、IL-10 mRNA表达水平降低;处理24 h后细胞表面CD155、PD-L1、Galectin-9表达水平降低。经芪玉三龙汤处理的M2型巨噬细胞分别与CD4+、CD8+T淋巴细胞共培养后,CD4+、CD8+T细胞表面TIGIT的表达受到明显抑制。结论 芪玉三龙汤能够诱导小鼠腹腔M2型巨噬细胞向M1型极化,并且极化后的细胞能够抑制T细胞负性调节分子的表达。

关 键 词:芪玉三龙汤  巨噬细胞  极化  负性调节分子  免疫治疗

Role of Qiyu Sanlong Decoction in Regulating Mouse Peritoneal Macrophage M2/M1 Polarization and Its Effect on CD4+ and CD8+ T Cells
Institution:1. Anhui University of Chinese Medicine, Anhui Hefei 230012, China; 2. Department of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine Oncology, The First Affiliated Hospital of Anhui Medical University, Anhui Hefei 230022, China; 3. The First Affiliated Hospital of Anhui University of Chinese Medicine, Anhui Hefei 230031, China
Abstract:
Keywords:Qiyu Sanlong Decoction  Macrophage  Polarization  Negative regulator molecule  Immunotherapy
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