| 猪捷申病毒Swine/CH/IMH/03株VP1蛋白的原核表达及其反应原性 |
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| 引用本文： | 申识川,时洪艳,陈建飞,孙东波,吕茂杰,王承宝,范秀萍,陈小金,冯力. 猪捷申病毒Swine/CH/IMH/03株VP1蛋白的原核表达及其反应原性[J]. 中国兽医科学, 2009, 39(10) |
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| 作者姓名： | 申识川 时洪艳 陈建飞 孙东波 吕茂杰 王承宝 范秀萍 陈小金 冯力 |
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| 作者单位： | 申识川,范秀萍(中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室,黑龙江,哈尔滨,150001;东北农业大学生命科学学院,黑龙江,哈尔滨,150030);时洪艳,陈建飞,孙东波,吕茂杰,王承宝,陈小金,冯力(中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室,黑龙江,哈尔滨,150001) |
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| 摘 要： | 根据猪捷申病毒(PTV)Swine/CH/IMH/03株的基因组序列(GenBank登录号:DQ355222)设计了1对引物,采用RT-PCR方法扩增出了PTV的VP1基因片段,将其克隆到表达载体pET-32a(+)中,构建了重组质粒pET-VP1,经测序鉴定正确后,将其转化感受态细胞BL21(DE3)中,并进行IPTG诱导表达.结果表明,重组菌可表达分子质量为45 ku的融合蛋白,在1.0 mmol/L IPTG诱导6 h后,重组菌的表达效果最好,目的蛋白表达量占菌体总蛋白的63.4%,表达的蛋白以包涵体的形式存在于菌体中.表达产物经Ni柱纯化后,薄层扫描显示,目的蛋白的纯度达到了97%.Western-blot结果显示,纯化后的VP1蛋白能与PTV Swine/CH/IMH/03株阳性血清发生特异性的免疫印迹反应,表明,原核表达的VP1蛋白具有良好的反应原性.
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| 关 键 词： | 猪捷申病毒 VP1基因 克隆 原核表达 纯化 免疫印迹 |
Expression of porcine teschovirus Swine/CH/IMH/03 strain VP1 protein in Escherichia coli and analysis of its reactinogenicity |
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