用生物素标记核酸探针检测牛传染性鼻气管炎病毒的研究 |
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引用本文: | 吴时友,宫云浩.用生物素标记核酸探针检测牛传染性鼻气管炎病毒的研究[J].中国兽医科学,1988(8). |
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作者姓名: | 吴时友 宫云浩 |
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作者单位: | 农业部动物检疫所
(吴时友),农业部动物检疫所(宫云浩) |
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摘 要: | 将纯化的牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)全基因组用缺口翻译方法把生物素—尿苷三磷酸(Biotin-dUTP)掺入双链IBRV—DNA上作为探针,与点在硝酸纤维膜上的样品进行打点杂交,然后在链霉亲合素—碱性磷酸酶中孵育,用氮蓝四唑和5—溴—4—氯—3—吲哚磷酸作用,阳性反应呈现紫色斑点。通过检测样品中IBRV—DNA同源序列,以确定是否存在IBRV。结果表明,应用生物素核酸探针可检出10pg的IBRV—DNA,具有灵敏、快速、无放射性污染、探针保存时间长等优点,为IBRV临床检测提供了一个有力的手段。
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