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水泡性口炎病毒N基因的克隆及其PCR检测方法的建立
引用本文:王海霞,郑增忍,龚振华,张彦明,宫云浩,孙淑芳,李会荣,郭福生,蒋正军.水泡性口炎病毒N基因的克隆及其PCR检测方法的建立[J].中国兽医科学,2003,33(12):11-14.
作者姓名:王海霞  郑增忍  龚振华  张彦明  宫云浩  孙淑芳  李会荣  郭福生  蒋正军
作者单位:1. 西北农林科技大学,动物科技学院,陕西,杨凌,712100;农业部动物检疫所,动物及动物产品卫生质量监督检验测试中心,山东,青岛,266032
2. 农业部动物检疫所,动物及动物产品卫生质量监督检验测试中心,山东,青岛,266032
3. 西北农林科技大学,动物科技学院,陕西,杨凌,712100
4. 温哥华病毒研究中心病毒及分子生物学部,加拿大,温哥华
摘    要:根据国外发表的水泡性口炎病毒 (VSV)基因组核苷酸序列 ,设计了 2对特异性引物 ,通过RT PCR方法得到N基因。将此基因与 pGEM TEasyVector相连 ,通过蓝白斑筛选出阳性克隆 ,碱裂解法小剂量提取质粒。经测定 ,N基因与参考序列同源性高达 99%。同时根据克隆产物进行亚克隆 ,建立了VSV的PCR检测方法。

关 键 词:水泡性口炎病毒  N基因  克隆  PCR检测
文章编号:1000-6419(2003)12-0011-04
修稿时间:2003年10月10

Cloning of N gene of vesicular stomatitis virus (VSV) and establishment of the PCR method for dectection of VSV
WANG Hai-xia.Cloning of N gene of vesicular stomatitis virus (VSV) and establishment of the PCR method for dectection of VSV[J].Veterinary Science in China,2003,33(12):11-14.
Authors:WANG Hai-xia
Institution:WANG Hai-xia~
Abstract:A pair of primers was designed to amplify N gene of VSV according to the published relevant sequence of the virus. The N gene was obtained by RT-PCR and sequenced after being directly inserted into the pGEM-T Easy Vector. The result showed that the homology between N gene and the published sequence was 99%.Based on the cloning of N gene,another pair of primers was designed. Through subcloning,a new PCR method had been established to detect the VSV.
Keywords:vesicular stomatitis virus  N gene  cloning  PCR detection
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