伪狂犬病病毒Ea株UL14基因的真核表达和功能域分析 |
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引用本文: | 张辉,王贝贝,李奇,刘凯. 伪狂犬病病毒Ea株UL14基因的真核表达和功能域分析[J]. 中国兽医科学, 2010, 40(9) |
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作者姓名: | 张辉 王贝贝 李奇 刘凯 |
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作者单位: | 淮北师范大学生命科学学院,安徽,淮北,235000 |
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基金项目: | 安徽省自然科学基金项目,安徽省优秀青年人才基金项目 |
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摘 要: | 通过PCR方法扩增伪狂犬病病毒(PRV)Ea株UL14基因,克隆到pEGFP-C1载体中,构建EG-FP-UL14融合的真核表达质粒pEGFP-UL14。将pEGFP-UL14转染Hela细胞,并与对照质粒pEGFP-C1进行比较,发现EGFP-UL14融合蛋白在转染后第48小时荧光主要分布在胞浆,但随着时间的延长,荧光逐渐向细胞核中转移,在转染后第72小时完全定位于核中。为进一步分析UL14蛋白的细胞定位功能域,构建了一系列UL14C-端、N-端缺失突变体。将上述突变体分别与EGFP融合,构建了UL14不同区域与EG-FP融合的重组表达质粒,分别转染Hela细胞后,证实UL14的第37~65位氨基酸对其细胞定位具有重要作用。研究结果为进一步阐明PRV UL14的功能奠定了基础。
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关 键 词: | 伪狂犬病病毒 真核表达 功能域分析 |
Eukaryotic expression of UL14 gene of pseudorabies virus Ea strain and analysis of the functional domains of the expressed protein |
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Abstract: | |
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Keywords: | UL14 |
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