| 猪圆环病毒2型ORF2基因插入猪细小病毒VP2基因3'端对病毒样颗粒形成的影响 |
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| 引用本文： | 徐志文,郭万柱,蒋清蓉,朱玲,熊丁杰,王印,徐凯,王小玉. 猪圆环病毒2型ORF2基因插入猪细小病毒VP2基因3'端对病毒样颗粒形成的影响[J]. 中国兽医科学, 2009, 39(2) |
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| 作者姓名： | 徐志文 郭万柱 蒋清蓉 朱玲 熊丁杰 王印 徐凯 王小玉 |
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| 作者单位： | 四川农业大学动物生物技术中心,四川雅安,625014 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，四川省科技厅科技攻关项目，四川省教育厅重点实验室项目，四川省青年科技基金 |
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| 摘 要： | 以猪细小病毒(PPV)四川分离株SC-1的VP2基因3'端为靶点,在第1215和1216位之间插入长约700 bp的猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因片段,将重组后的PPV VP2-PCV2 ORF2克隆到真核表达载体pEGFP-C1中,构建了重组质粒pEGFP.VO;经酶切和PCR鉴定后,采用脂质体介导法将重组质粒pEGFP.VO转染COS-7细胞,应用倒置荧光显微镜、电镜、免疫荧光以及生物信息学技术对表达产物进行观察分析.结果显示,重组质粒pEGFP.VO在COS-7细胞中得到表达,但在电镜下没有观察到病毒样颗粒.通过对PPV衣壳蛋白的三维结构分析及免疫荧光检测发现,PCV2 ORF2基因的插入位点位于PPVVP2基因的3'端,相应表达产物则位于VP2蛋白多肽的C端,且被其包裹在内,这可能影响了病毒样颗粒的形成,表明,PPV VP2基因3'端不适合外源基因插入构建重组病毒样颗粒.
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| 关 键 词： | 猪细小病毒 VP2基因 插入位点 病毒样颗粒 |
Influence of insertion of porcine circovirus type 20RF2 gene into the 3' end of porcine parvovirus VP2 gene on formation of virus-like particle |
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| XU Zhi-wen,GUO Wan-zhu,JIANG Qing-rong,ZHU Ling,XIONG Ding-jie,WANG Yin,XU Kai,WANG Xiao-yu. Influence of insertion of porcine circovirus type 20RF2 gene into the 3' end of porcine parvovirus VP2 gene on formation of virus-like particle[J]. Chinese Veterinary Science, 2009, 39(2) |
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| Authors: | XU Zhi-wen GUO Wan-zhu JIANG Qing-rong ZHU Ling XIONG Ding-jie WANG Yin XU Kai WANG Xiao-yu |
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