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多头带绦虫Tm16基因的克隆表达与免疫原性分析
引用本文:王颖旺,杨应东,杨光友,牟静,安晓雪,古小彬,王淑贤,边尧. 多头带绦虫Tm16基因的克隆表达与免疫原性分析[J]. 中国兽医科学, 2010, 40(9)
作者姓名:王颖旺  杨应东  杨光友  牟静  安晓雪  古小彬  王淑贤  边尧
作者单位:王颖旺,杨光友,牟静,安晓雪,古小彬,王淑贤(四川农业大学,动物医学院,四川,雅安,625014);杨应东(四川农业大学,动物医学院,四川,雅安,625014;四川省攀枝花市农林科学研究院,畜牧水产研究所,四川,攀枝花,617061);边尧(四川省雅安市雨城区畜牧局,四川,雅安,625000) 
基金项目:教育部"长江学者和创新团队发展计划"创新团队项目 
摘    要:为分析多头带绦虫Tm16重组蛋白的免疫原性,利用RT-PCR技术从激活的多头带绦虫六钩蚴中扩增Tm16基因,将扩增产物亚克隆入pET32a(+)载体中,构建pET32a-Tm16表达载体,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达融合蛋白;表达产物进行SDS-PAGE和Western-blot分析后,将纯化的Tm16重组蛋白免疫小鼠,用ELISA检测其血清抗体。结果显示,多头带绦虫Tm16基因序列长569bp,包括1个399bp的开放阅读框,与已报道的Tm16基因(序列号:EF672036)的序列同源性为99.8%。表达的重组蛋白大小约为30.69ku,与脑多头蚴病羊血清的免疫印迹分析呈阳性反应;小鼠免疫1周后血清中即可检测到抗Tm16蛋白的特异性抗体,并于免疫后第5周达到高峰。结果表明Tm16重组蛋白具有较好的免疫原性,可作为脑多头蚴病疫苗的候选抗原。

关 键 词:多头带绦虫  Tm16基因  克隆  表达  免疫原性

Cloning and prokaryotic expression of Tm 16 gene from Taenia multiceps oncospheres and immunogenicity analysis of its expressed product
Abstract:
Keywords:
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