| PCV2 ORF2基因在大肠杆菌中的表达及ELISA检测方法的建立 |
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| 引用本文： | WANG Xian-wen,毕英佐,XIE Qing-mei,王新卫,CAO Yong-chang,于康震. PCV2 ORF2基因在大肠杆菌中的表达及ELISA检测方法的建立[J]. 中国兽医科学, 2008, 38(8) |
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| 作者姓名： | WANG Xian-wen 毕英佐 XIE Qing-mei 王新卫 CAO Yong-chang 于康震 |
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| 作者单位： | 华南农业大学动物科学学院,广东,广州,510642 |
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| 基金项目： | 广东省科技厅专项基金 |
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| 摘 要： | 采用PCR扩增了猪圆环病毒Ⅱ型广东分离株的ORF2 3'端基因,将其连接到pET32a(+)质粒上并转化DH5a细胞,重组质粒经PCR和酶切鉴定并测序后,转化BL21菌,用1 mmol/L IPTG诱导表达重组菌.经sDS-PAGE和Western-blot分析,表明ORF2基因已在大肠杆菌中正确表达,表达的融合蛋白的分子质量约为33 ku;表达产物经超声波处理后,用Ni-NTA柱纯化,复性,用此纯化产物包被酶标板,建立了ELISA诊断方法,经对临床516份血清样品进行检测,结果表明仔猪的血清阳性率为35.2%,育肥猪的血清阳性率为60.6%,种猪的血清阳性率为69.8%.
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| 关 键 词： | 猪圆环病毒Ⅱ型 ORF2基因 酶联免疫吸附试验 表达 |
Expression of ORF2 gene of porcine circovirus type 2 in Escherichia coli and establishment of an ELISA |
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| WANG Xian-wen,BI Ying-zuo,XIE Qing-mei,WANG Xin-wei,CAO Yong-chang,YU Kang-zhen. Expression of ORF2 gene of porcine circovirus type 2 in Escherichia coli and establishment of an ELISA[J]. Chinese Veterinary Science, 2008, 38(8) |
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| Authors: | WANG Xian-wen BI Ying-zuo XIE Qing-mei WANG Xin-wei CAO Yong-chang YU Kang-zhen |
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