| 胸膜肺炎放线杆菌体内表达基因的筛选 |
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| 引用本文： | 刘慧芳,刘思国,王春来,司微,王聃,杜艳芬,赵海玲,赫明雷.胸膜肺炎放线杆菌体内表达基因的筛选[J].中国兽医科学,2008,38(10). |
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| 作者姓名： | 刘慧芳 刘思国 王春来 司微 王聃 杜艳芬 赵海玲 赫明雷 |
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| 基金项目： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所中央级公益性科研院所基本科研业务专项资金项目 |
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| 摘 要： | 利用体内诱导抗原技术对胸膜肺炎放线杆菌(APP)体内表达的基因进行了初步筛选.将收集到的5份感染了APP1型的猪血清混合,分别用体外培养的APP1和大肠杆菌BL21(DE3)的全菌及全菌裂解物进行吸附,用ELISA方法检测吸附效果,经吸附后血清D450nm分别由原来的0.927和0.239降低为0.196和0.078.同时,将APP1基因组DNA以Bsp143 Ⅰ进行酶切,回收500～2000 bp的片段,与pET30a/b/c载体连接,构建了APP1基因组质粒表达文库,库容量(CFU)为2.0×105.用吸附后的血清通过菌落原位免疫杂交筛选该基因组表达文库,从3 000个菌落中获得了12个阳性克隆.
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| 关 键 词： | 胸膜肺炎放线杆菌 体内诱导抗原技术 菌落原位免疫杂交 |
Screening on the expression genes of Actinobacillus pleuropneumoniae in vivo |
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| LIU Hui-fang,LIU Si-guo,WANG Chun-lai,SI Wei,WANG Dan,DU Yan-fen,ZHAO Hai-ling,HE Ming-lei.Screening on the expression genes of Actinobacillus pleuropneumoniae in vivo[J].Veterinary Science in China,2008,38(10). |
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| Authors: | LIU Hui-fang LIU Si-guo WANG Chun-lai SI Wei WANG Dan DU Yan-fen ZHAO Hai-ling HE Ming-lei |
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