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| 重组鸡IFN-α的高效表达与一步复性和纯化 | |
| 作者姓名： | 魏双施 王艺萌 王巍 孙仰峰 王君伟 |
| 作者单位： | 东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨,150030 |
| 摘 要： | 通过在线网站以及生物学软件分析,将天然鸡IFN-α基因中的稀有密码子同义替换为大肠杆菌偏好的密码子.优化后的基因经人工合成后与温控型表达载体pWL连接并转入大肠杆菌中进行诱导表达,经SDS-PAGE分析,表达产物的分子质量约为19 ku,表达量占总蛋白的28.3%.表达产物主要以包涵体形式存在,用高浓度变性剂溶解后,采用Sephadex G50凝胶过滤一步复性并纯化重组鸡IFN-α,纯度可达98%以上.每1 L培养基可以得到47.1 mg的重组鸡IFN-α,产出率达34.14%.表达的重组鸡IFN-α在CEF/NDV检测系统上的比活性为1.12×10~8U/mg. |
| 关 键 词： | 鸡 α-干扰素 基因优化 一步法 复性和纯化 IFN-α |
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